上海哈灵生物ELISA试剂盒研究所

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发布时间:2017-09-29浏览次数:555返回列表

主要用途

脂肪酸β氧化速率(β oxidation rate)比色法检测试剂是一种旨在通过棕榈酰肉碱氧化依赖性铁还原,即单位时间还原产物的峰值降低,即采用比色法来测定线粒体裂解样品中脂肪酸β氧化速率的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞、组织中线粒体裂解悬液样品(动物、人体等)脂肪酸β氧化速率的检测。苹果彩票严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。

技术背景

脂肪酸β氧化过程(β-oxidation)在动物组织的线粒体发生的脂肪酸代谢通路,可概括为活化、转移、β氧化及后经三羧酸循环被彻底氧化生成CO2和H2O,并释放能量等四个阶段,是体内,尤其是组织器官,例如肝脏、心脏和骨骼肌等能量内平衡的关键代谢通路。食物中甘油三酯提供体内三分之一的能量供给,骨骼肌和心脏消耗80%的总能量。脂肪酸代谢异常,将导致脂质聚集在非脂肪组织内,产生慢性病的病理基础,例如糖尿病、心衰、肥胖症等。其中β氧化,包括脱氢、水合、二次脱氢和硫解,是将活化的各种长度脂酰辅酶酯(acyl CoA esters)不断缩短为乙酰辅酶A(acetyl CoA)单位,后经过三羧酸循环和呼吸链氧化成CO2和水。脂酰基辅酶A脱氢酶(acyl CoA dehydrogenase;AD;EC.1.3.99.3)是脂肪酸代谢进入β-氧化后工作的重要酶之一。通过底物棕榈酰肉碱(palmitoyl carnitine)的氧化产生的电子,由铁(ferricyanide)捕获而还原,其还原速率的检测,来评价β氧化的速率,即吸光值(420nm波长)的下降与时间的对应关系。 

用户自备

1.5毫升离心管:用于反应操作的容器
比色皿:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析

注意事项

1.本苹果彩票为20次操作,包括背景对照
2.操作时,须戴手套
3.系统操作过程中,背景测定只需1次
4.样品须澄清,至关重要 
5.加样后3秒内比色测定
6.测定值由高到低变化;测定可持续5分钟
7.比色测定后,比色皿须清洗彻底
8.样本测定0分钟读数高于5分钟读数表明具有氧化功能
9.建议待测样本线粒体蛋白浓度为500微克/50微升(本公司提供Bradford蛋白质浓度定量试剂盒-30030.1) 
10.如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度
11.本公司提供系列脂肪酸代谢检测试剂苹果彩票
 
质量标准

1.本苹果彩票经鉴定性能稳定
2.本苹果彩票经鉴定检测敏感